流行的小面积多样点取样常常仅检测到少量森林土壤中的乔木种子，给森林土壤种子库物种结果的解读与应用带来困难。版纳植物园恢复生态研究组的沈有信副研究员等，于多数木本物种种子散落后，在云南半湿润常绿阔叶林的已经做过植被调查的1ha样地内采集了100个10cm（长）×10cm（宽）×10cm（深度）土壤样品（小面积大样本，简称LNSS）和30个1m×1m×10cm土壤样品（大面积小样本，简称SNLS）。LNSS样本于室内萌发以获取最佳结果，而SNLS样本就近置换采样区周围的次生森林，灌木和草地表层土壤（各10份）。构建木本物种种数与面积的指数关系（S=cA^z）来分析比对LNSS和SNLS之间的差异，同时以10%定律（取样面积增加10%时，物种的增加数也为10%时）计算最小取样总面积。

结果表明，100个LNSS中仅检测到15.7%的地表木本物种，而10个各萌发于次生森林，灌木和草地的SNLS检测到的比例为22.9%，37.3%和20.5%。据SNLS种面积曲线计算得到所研究森林的最小总取样面积为4m²，此时于最佳野外萌发状态（灌木林）下可获得27.1%的地表木本物种。如果LNSS的总取样面积达到4m²时，也可获得近似的地表木本物种检出比例（28.1%）。对比现有文献中大量的森林土壤种子库研究，很少有此数值的取样面积，尤其是在木本物种多样性程度很高的热带、亚热带区域。增加样方面积，既可获得较大的总取样面积（如100个20cm（长）×20cm（宽）的样方可获得4m²总取样面积），又可冲减取样数量增加导致的野外采样和室内萌发成本。 

该研究成果以Large Sample Area and Size Are Needed for Forest Soil Seed Bank Studies to Ensure Low Discrepancy with Standing Vegetation为题发表在PLoS ONE上。

　　图1：小面积大样本取样获得的木本物种累积曲线及其95% 置信期间。 

图2：大面积小样本取样后置换次生林、灌木和草本土壤获得的木本物种累积曲线及其95% 置信期间。