近几年，激光共聚焦扫描显微技术发展迅速，已成为生命科学研究领域中一个强有力的工具。为使共聚焦显微镜用户更多地了解相关的前沿技术、更熟练地掌握显微镜高级技能，蔡司公司于2015年3月12日至13日在重庆第三军医大学举办了“2015年西南地区显微镜培训班课程”，版纳植物园中心实验室王力和曹力应邀参加了此次培训。 

　　3月12日上午，培训班在生物医学分析测试中心开始进行授课。首先，美国加州大学圣克鲁兹分校访问学者樊少鹏博士做了题为“Two photon imaging of brain: static and dynamic view”的报告，从一个神经科学研究人员的视角，阐述了双光子显微镜的工作原理、制样方法以及在神经科学领域中的重要用途。之后，蔡司应用工程师陆赟做了“多通道荧光及光谱拆分”报告，为大家讲解了激光共聚焦显微镜在多通道荧光拍摄中荧光串色的各种原因和类别（发射光串色和激发光串色），并给出了相应的解决方案，比如使用不同的扫描模式、进行光谱拆分和合适的制样方法等。 

　　3月12日下午，学员们分成小组，分别开始在蔡司工程师的指导下进行上机操作和现场交流学习。在第一节课中，小组成员首先学习了七种主要的显微镜观察方式，包括：明场观察、暗场观察、相差观察、DIC观察（微分干涉）、霍夫曼观察、偏光观察和荧光观察，并进行了科勒照明的调节。在第二节课中，张彦工程师首先讲解了共聚焦显微镜的荧光共定位分析方法、图像分析方法和三维可视化方法，随后指导学员们进行上机演练。对于如何分析一张图像，张彦进行了详细的讲解，其步骤包括：通道分类、区域划分、阈值分割、分割物体、范围筛选、手动修改和参数选择等。 

　　3月13日上午，张彦工程师介绍了蔡司公司新推出的共聚焦显微镜产品——LSM880，该款显微镜可以配备Airyscan检测器，将共聚焦成像推进了新的世界。其特点包括：（1）没有任何样品限制，（2）容易进行多色实验，（3）在厚样品中也有很好的成像效果，（4）活细胞长期实验观察，（5）可进行FRAP/FRET实验，（6）可对数据定量分析，（7）可以使用共聚焦显微镜本身所有的激光器以及所有染料，（8）为一款用于正置显微镜观察的超高分辨率产品。随后，黄伟杰工程师讲述了荧光高级应用，包括光干扰技术和荧光共振能量转移等。最后，维修工程师蔡光俊讲解了共聚焦显微镜的安全注意事项、维护方法和若干问题的解决办法。 

　　3月13日下午，小组成员在陆赟工程师指导下，利用双光子显微镜进行了多通道荧光扫描和光谱拆分的上机操作。 

　　培训结束后，王力和曹力获得了蔡司公司颁发的培训合格证书。本次培训不仅增强了中心实验室参会人员的显微镜应用操作技能，还开拓了他们的科技视野，同时加强了与蔡司公司的合作交流。本次培训将促进版纳植物园共聚焦显微镜在科学研究中发挥出更大的价值。（王力撰文） 

培训班授课（1）

培训班授课（2）

培训班授课（3）

学习7种显微镜观察方式

利用双光子显微镜进行光谱拆分（1）

利用双光子显微镜进行光谱拆分（2）